معظم المكونات الخلوية عديمة اللون ولا يمكن تمييزها بوضوح تحت المجهر. الفرضية الأساسية لالمجهر مضانهو تلطيخ المكونات بالأصباغ.
الأصباغ الفلورية، والمعروفة أيضًا باسم الفلور أو الأصباغ الفلورية، هي جزيئات تمتص ضوء الإثارة بطول موجة معين (عادةً الأشعة فوق البنفسجية) وتنبعث منها ضوءًا بطول موجي أطول بعد تأخير قصير. التأخير بين الامتصاص والانبعاث لا يكاد يذكر، عادةً في حدود النانو ثانية.
ويمكن بعد ذلك تصفية الضوء المنبعث من ضوء الإثارة للكشف عن موقع الفلوروفور.
يستخدم المجهر الفلوري ضوءًا أكثر كثافة لإضاءة العينة. يثير هذا الضوء مادة الفلورسنت في العينة، والتي تبعث بعد ذلك الضوء بطول موجي أطول.
تعتمد الصورة الناتجة على الطول الموجي للانبعاث لمصدر ضوء ثانٍ أو مادة فلورسنت غير الضوء المستخدم في الأصل لإضاءة العينة وإثارةها.
يعالج
يتم تركيز الضوء عند الطول الموجي للإثارة على العينة من خلال العدسة الموضوعية. ويركز الفلورسنت المنبعث من العينة على الكاشف من خلال العدسة الموضوعية. وبما أن معظم ضوء الإثارة ينتقل عبر العينة، فإن ضوء الإثارة المنعكس فقط هو الذي يصل إلى الهدف مع الضوء المنبعث.
استمارة
يشير "المجهر الفلوري" إلى أي مجهر يستخدم الفلورة لتوليد الصور، سواء كان جهازًا أبسط مثل المجهر الفلوري، أو تصميمًا أكثر تعقيدًا مثل المجهر متحد البؤر، والذي يستخدم التقسيم البصري للحصول على دقة أفضل. صورة مضان.
معظم المجاهر الفلورية المستخدمة هي مجاهر التألق الفوقي، حيث يتم إثارة الفلوروفورات والكشف عن التألق من خلال نفس المسار البصري (أي من خلال العدسة الشيئية).
